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La institución fue fundada el 20 de marzo de 1935 y su principal actividad es el fútbol,
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El 4 de marzo de 1978, Defensa y Justicia debuta en el Torneo de Primera D, derrotando 2-1 a Cañuelas con goles de Héctor Cardozo y de Jorge Giache.
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La primera época dorada del club llegó cuando jugó en la Primera D hasta 1982 y a partir de noviembre de 1985, El Halcón ascendió a la B, con claras chances de llegar a la A.
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Sin dudas uno de los momentos más tristes y dolorosos de la historia del club se dio en el Campeonato Nacional B 1992-93 donde el club Defensa y Justicia finalizó entre los tres peores promedios junto a Villa Dalmine y Racing de Córdoba desencadenando su descenso.
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En el año 1997 el nuevo Estadio Centenario del Quilmes Atlético Club hizo de escenario neutral para disputar ambas finales de la tercera categoría. Tras vencer por 2 a 1 a Tristán Suárez en la segunda final, DyJ se consagró campeón, logrando así el ansiado ascenso a la segunda categoría de AFA y siendo el primer equipo en dar la vuelta olímpica en dicho estadio recién inaugurado.
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Con Julio Ricardo Villa como DT tras un campeonato regular no muy bueno, el Halcón en los partidos mano a mano logra pasar de rondas eliminando a Arsenal (uno de los candidatos), en la lucha por ascender a primera y llegando a disputar con Chacarita las semifinales del torneo. Empató el primer partido jugado en Banfield y perdió en San Martín redondeando una gran campaña.
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Con el debut de Jorge Burruchaga como técnico, otro campeón del mundo, fue conformando un equipo vistoso que jugaba muy bien aunque finalmente no pudo clasificarse al reducido por los ascensos. Sin dudas el mejor partido fue el 3-2 a Quilmes en la cancha de Racing, partido que bajó al Cervecero de la punta faltando muy poco para terminar el torneo.
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El 13 de mayo, el rival San Martín (SJ) ganaba 1-0 y conservaba las chances de ser campeón, pero en tiempo de descuento tras un tiro de esquina, Hernando peina la pelota y Jesús Nievas en la línea pone el empate agónico que salva del desempate y condena a El Porvenir a jugar en la B Metropolitana.
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El 3 de junio de 2006 se juega el partido más dramático en la historia de Defensa y Justicia, después de haber empatado 1-1 en la ida con Morón, perdía 3-1 en el Estadio Tomaghello repleto. En tiempo de descuento anota Ramírez el 2-3 y apenas un par de minutos después en una patriada de Ezequiel Miralles con un gol de tiro libre llegaba el 3-3 para mantener la categoría. Desde ese día, se celebra el Día del Hincha de Defensa y Justicia.
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Luego de un pobre Apertura, asume Ricardo Rezza que recién en el 2007 logra un juego colectivo de alto nivel futbolístico. Son recordados los partidos en La Plata cuando da vuelta el resultado frente a Chacarita que llegaba puntero, con dos jugadores menos en la cancha lesionados, conquistando así la punta del torneo, el último campeón y serio candidato nuevamente. Con tres triunfos seguidos, Defensa llega con chances de ser campeón a la última fecha.
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Campeonato irregular con Rezza, asume Kuzemka como DT, con él Defensa recupera la efectividad como local y además lo más destacado fue la primera victoria ante Quilmes en el Centenario con el recordado gol de Mariano Sabadía.